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生化試劑主要性能與使用時注意事項2021/11/03

生化試劑主要性能指標：1.穩(wěn)定性：指在規(guī)定條件下經(jīng)過一段時間的保存，仍能達到相應(yīng)的性能指標，如試劑空白吸光度、線性范圍、靈敏度等。2.反應(yīng)靈敏度：指單位濃度(或活性)的測定物反應(yīng)所產(chǎn)生的反應(yīng)度，反應(yīng)度越高，靈敏度越大。3.精密度：結(jié)果間相互符合的*程度。4.準確度：與參考測定程序結(jié)果的*性。5.線性范圍：在規(guī)定的重復(fù)性和線性偏差下，測得的濃度或活性值與設(shè)定的濃度或活性值之間的比例關(guān)系的范圍。6.基質(zhì)效應(yīng)：基質(zhì)指的是樣品中被分析物以外的組分。基質(zhì)常常對分析物的分析過程有顯著的干擾，并影響分析結(jié)果的

抗體的保存需要注意要點2021/10/26

抗體純化后，一般將其緩沖液置換成PBS，便于后期標記或其他用途使用，如果濃度太低，需要濃縮,抗體濃縮后濃度最好不要太高，太高容易引起沉淀。透析濃縮方法：1.透析袋濃縮將純化的抗體裝入透析袋中，透析袋表面覆滿PEG20,000進行濃縮（不要用蔗糖濃縮）。2.超濾管濃縮將純化的抗體轉(zhuǎn)入15ml的超濾管，3,500rpm離心12min左右（根據(jù)要濃縮的體積摸索離心時間）。3.抗體濃度測定取適量抗體檢測OD280nm的吸光度，讀數(shù)不要超過2。如果讀數(shù)超過2，再稀釋，用吸光度讀數(shù)除以1.35，再乘以稀釋倍

普通抗體的五個種類2021/10/20

按照不同的分類方式，抗體可以分成許多類型，目前常用的分類方式將普通抗體按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分為IgG、IgM、IgA、IgE、IgD五類。--IgG是血清中一種主要的Ig，含量占總Ig的65—75%左右。廣泛分布于組織液中，血管內(nèi)、外間隙中分布量大體相當。是機體抗感染的一種重要物質(zhì)。--IgM是成熟胎兒合成的第一類Ig，也是在感染或免疫后最早產(chǎn)生的Ig，5類Ig中IgM*，故其細胞毒活性和細胞溶解活性也*。天然的血型抗體是IgM，有些自身抗體如抗磷脂抗體、RF等也屬于IgM。胎兒臍血中IgM抗

ELISA試劑盒有高特異性優(yōu)勢三個具體表現(xiàn)2021/10/12

ELISA試劑盒實驗因多重優(yōu)勢在免疫學(xué)檢驗中得到廣泛應(yīng)用，急速發(fā)展。那么它所擁有的高特異性優(yōu)勢有哪些呢？1.特異性：指試劑正確檢定不存在的被檢物質(zhì)的能力（無假陽性），取決于包被抗原（體）及標記抗原（體）的純度及特異性。2.穩(wěn)定性：試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間，一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存，定期測定其靈敏度，特異性和精密度等指標，直到其質(zhì)量指標開始下降為止，通常認為37℃每穩(wěn)定一天相當于4-10℃保存一個半月。3.簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在

DNA復(fù)制酶系作用順序2021/10/08

1.拓撲異構(gòu)酶使DNA超螺旋結(jié)構(gòu)解開，形成其基本的雙螺旋結(jié)構(gòu)。2.解鏈酶使DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)解開，堿基間氫鍵斷裂，形成兩條單鏈DNA，構(gòu)成”復(fù)制叉“。3.單鏈DNA結(jié)合蛋白單鏈DNA結(jié)合蛋白結(jié)合在兩條單鏈DNA上，穩(wěn)定單鏈DNA，阻止DNA復(fù)性，避免被核酸酶降解，便于復(fù)制子代DNA。4.引物酶是一種依賴DNA的RNA聚合酶，該酶以DNA為模板，聚合一段RNA短鏈引物，以提供自由的3'-OH，形成引發(fā)體，使子代DNA鏈能夠開始聚合。5.DNA聚合酶由于DNA聚合酶只能以5'→3'方向聚合子代DNA鏈

解析了解細胞培養(yǎng)基2021/09/27

常見問題解答：Q：針對不同細胞，細胞培養(yǎng)基配方一樣嗎?如何獲知呢?A：不同細胞的培養(yǎng)基是不同的。一般ATCC購買的細胞，針對不同細胞株，會有詳細介紹，包括生長的狀態(tài)圖、培養(yǎng)基的類型等。如人源乳腺癌細胞MCF-7細胞一般為1640，人源肺癌細胞A549可用DMEM培養(yǎng)基。Q：培養(yǎng)基為什么一般都是偏紅色?A：因為培養(yǎng)基加了酚紅來顯示顏色，指示pH范圍為6-8，顏色會由黃變?yōu)樽霞t。這是為了我們能更直觀觀察培養(yǎng)液的變化，如變黃，則代表偏酸，偏堿性了就顯示偏紫色。一般來說，細胞吸收營養(yǎng)后，變黃后就暗示我們

化學(xué)試劑的貯存及貯存環(huán)境管理2021/09/24

化學(xué)試劑對于實驗室的作用及為重要，只是因為它的特殊性，對于它的管理也是實驗室管理工作的重中之重。那么該怎么管理才能做好化學(xué)試劑的管理呢？下面關(guān)于化學(xué)試劑（包括特殊的化學(xué)試劑）的貯存及貯存環(huán)境。一、化學(xué)試劑的貯存環(huán)境1、一般的化學(xué)試劑室應(yīng)保持陰涼、避光，以防止因為陽光照射及室溫偏高而造成的試劑變質(zhì)、失效等問題。2、化學(xué)試劑室內(nèi)應(yīng)嚴禁明火，并且要準備好消防滅火設(shè)施器材。3、化學(xué)試劑貯藏室室溫應(yīng)保持以5-25攝氏度。4、化學(xué)性質(zhì)或防護、滅火方法等會相互抵觸的化學(xué)危險品，不得在同一柜內(nèi)存放。5、危險品的

ELISA 測定法中用到的常規(guī)樣本制備指南2021/09/07

該指南適用于制備ELISA測定法中用到的常規(guī)樣本，而*的樣品制備程序可根據(jù)需測定靶標及測定方法法作相應(yīng)調(diào)整。選用新測定方法時，建議查閱相關(guān)文獻選擇與您樣本相似的實驗步驟作為參考。細胞培養(yǎng)物上清液將培養(yǎng)基移至離心管，4℃，1,500rpm離心10分鐘。立即進行上清液的分裝（血清）并在-80℃下保存樣品。盡可能減少反復(fù)凍融次數(shù)細胞提取物將組織培養(yǎng)板放置在冰上吸出培養(yǎng)基并用預(yù)冷PBS輕輕洗滌細胞一次吸出PBS，加入100mm培養(yǎng)板加入0.5ml*提取緩沖液收集細胞至在傾斜板中，然后移至經(jīng)過預(yù)冷的離心管

轉(zhuǎn)錄中介因子1-βELISA試劑盒標本要求2021/09/02

一、標本要求1.血清：溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。2.血漿：根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。3.尿液：無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分

細胞樣品的保存操作步驟2021/08/24

一、操作步驟：1、在37℃5%CO2條件下將細胞加在處理的載玻片上，用培育基培育，時間通過預(yù)試驗確定；2、細胞長好后，用洗刷液洗2分鐘×3次，室溫下將其放入細胞固定液中固定30-60min，蒸餾水洗刷；3、室溫下用洗刷液充沛洗刷固定細胞，（干燥后-20℃冰凍保存2周以上）4、雜交前將固定的細胞進行如下處理；順次在70%，90%，100%的乙醇中浸泡，脫水每次5min，用二甲苯洗刷，除掉殘留脂質(zhì)順次在100%，90%，70%乙醇中浸泡，進行再水化，每次5min，后浸泡于洗刷液中；5、在37℃用胃蛋

介紹三種細胞培養(yǎng)培養(yǎng)條件2021/08/18

細胞培養(yǎng)培養(yǎng)條件：一、動物細胞培養(yǎng):在所有的細胞離體培養(yǎng)中，最困難的是動物細胞培養(yǎng)。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清:動物細胞離體培養(yǎng)常常需要血清。常見的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質(zhì)和脂肪。有一天人們真正學(xué)會了配制和血清一樣的培養(yǎng)液，那時血清才可被取代。在這里，血清等于是動物細胞離體培養(yǎng)的天然營養(yǎng)液。⑵支持物:大多數(shù)動物細胞有貼壁生長的習(xí)慣。離體培養(yǎng)常用玻璃，高速冷凍離心機塑料等作為支持物。⑶氣體交換:二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養(yǎng)過程中不斷進行調(diào)節(jié)，不斷維持所需

小鼠線粒體DNA通用PCR試劑盒反應(yīng)五要素2021/08/04

需要自備的器材：1．方法儀器：分析天平、離心機、熒光PCR擴增儀、組織研磨器、-20℃冰箱、可調(diào)移液器（2µL、20µL、200µL、1000µL）。2．耗材：熒光PCR專用反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5mL經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水處理的滅菌離心管、吸頭（10µL、200µL、1000µL）、滅菌雙蒸水。反應(yīng)五要素：參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知

免疫熒光試劑盒操作步驟2021/07/28

免疫熒光染色試劑盒(ImmunolFluorenceStainingKit)系列是Elabscience®開發(fā)的用于細胞或組織切片檢測免疫熒光染色的試劑盒。在有適當?shù)囊豢箼z測特定的目標蛋白時，就可以使用免疫熒光染色試劑盒檢測到紅色、綠色或藍色等熒光。推薦Elabscience®的免疫熒光染色的試劑盒。操作步驟：1.免疫熒光染色的準備工作A.固定液的準備：推薦使用4%多聚甲醛作為固定液(E-IR-R113)，或根據(jù)特定的一抗或樣品采用有效成分為乙醇、甲醇或其它類型的固定液。B.TBST工作液的準備

細胞傳代培育過程中的原則與注意事項2021/07/21

在生物醫(yī)學(xué)試驗中常常會用到細胞系，指原代細胞培育物經(jīng)傳代成功后所繁衍的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培育細胞。細胞系是經(jīng)過細胞傳代或續(xù)代培育是將細胞從現(xiàn)有的培育物分隔或分出來開端新的培育，并參加新鮮培育液來促進擴增的常用手法。可是細胞系與新分離的或原代細胞的培育條件相類似，但也有一些根本不同的：（1）每個細胞系需求其特定的成長因子混合物（2）與原代細胞比較，它們的成長需求更嚴密的監(jiān)測，由于使它們無限成長的突變同時也會形成它們很快到達過度成長。因而，當細胞系成長到了簡直覆蓋整個培育器皿底部，也便是

elisa檢測試劑盒正確使用要點2021/07/16

雖然elisa檢測試劑盒看起來比較簡單，但實驗過程操作點的許多需要掌握操作步驟。如果稍有不慎，操作不合理的地方，會造成很多問題，ELISA試劑盒影響了檢測的精度，大大降低了測試質(zhì)量。如花板，假陽性，全彩色，全彩色，顏色空間的低。下面介紹elisa檢測試劑盒正確使用要點：1.血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3.細胞上清液：1

蛋白酶K（Proteinase K）知識課堂2021/07/07

蛋白酶K在BSE的檢測中用來消化PrPc,用來區(qū)別致病的PrPsc,它的正確使用對檢測特異性和敏感性都有重要影響。概述:蛋白酶K是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性。EDTA等鰲合劑或SDS等去垢劑不能使蛋白酶K失活,該酶在較廣的pH范圍內(nèi)(pH4-12.5)均有活性來源:源于白色念球菌(Tritirachiumalbum)反應(yīng)條件:蛋白酶K在較廣的緩沖液pH范圍(pH4-12.5),溫度范圍(37-60℃),鹽濃度(如:3MGuHCl)或尿素(4M)條件下均有活性

菌種常用的孢子分離的三種方法2021/06/30

為了獲得某種真菌類藥材的純菌種，必須從其它微生物中分離出來，稱為菌種的分離。常用的孢子分離又可分為以下幾種方法:1.褶上涂抹法:選取新鮮、健壯、未開傘、未破裂的子實體，洗凈后用0.1%sheng汞或75%酒精表面滅菌2分鐘，然后連同培養(yǎng)基一起放入接種箱內(nèi)，經(jīng)福爾馬林熏蒸消毒12~24小時，再按無菌操作技術(shù)將接種環(huán)在子實體菌褶上涂抹，把涂抹后帶孢子的接種環(huán)在培養(yǎng)基上劃線接種，，最后置于25~28℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，可得純菌種。2.孢子印采集法:取滅過菌的載玻片、試紙或黑布，置于新鮮、未開傘或未開裂的子

檢測實驗中七種常見微生物2021/06/23

在產(chǎn)品微生物檢測過程中，實驗員們會接觸到許多不同的微生物種類，小編就來總結(jié)下檢測實驗中常檢出的微生物。1.大腸菌群大腸菌群，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細菌。大腸菌群都是直接或間接地來自人和溫血動物的糞便。一般食品中大腸菌群超標，表示食品受動溫血動物的糞便污染，其中典型大腸桿菌為糞便近期污染，其他菌屬則可能為糞便的陳舊污染。人吃了大腸菌群超標的食物可能會導(dǎo)致：腸道傳染病、食物中毒等。2.霉菌霉菌，是絲狀真菌的俗稱，意即"發(fā)霉的真菌"，它們往往能形成分枝繁

分享6個讓細胞活躍的訣竅2021/06/17

細胞但是許多生物學(xué)試驗的主角。如果細胞心境欠好，那么試驗的效果也不會好到哪兒去。如何讓細胞活躍？1.保證一切試驗室資料都無菌穿插污染是細胞培育的大敵。即使是輕微的污染，也或許毀了幾個星期的效果。因培育箱內(nèi)溫暖潮濕，真菌極易成長，因而有必要留意定時清潔。此外，在將培育瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺之前，運用酒精擦洗潔凈，以防止污染。2.小心處理您的培育物細胞培育的脆弱性怎么著重也不為過。劇烈搖晃，或連續(xù)的溫度波動或許會對成長發(fā)生不利的影響。保證培育箱是水平的，溫度均一，且遠離電動儀器。此外，

提高ELISA的精確重現(xiàn)性解決辦法2021/06/09

免疫檢測法的精確性表現(xiàn)為單次實驗孔間（批內(nèi)）的重復(fù)性和多次實驗之間（批間）的重復(fù)性。CV值高則表明精確度低，通常由以下兩個原因造成：移液技術(shù)和洗滌技術(shù)。移液技術(shù)1.移液時，槍頭應(yīng)對準孔中央，避免接觸孔壁及底部。2.移液后輕輕晃動混勻試劑。3.如果您的樣品具有黏性，請預(yù)先潤洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時等待片刻使體積平衡后再取出。4.移液不充分或移液體積不均，說明移液器需要校正。必要時請檢查移液器并重新校正。5.加樣時，不同的試劑標準品和樣本間都要確保更換槍頭，避免交叉污染。6.確保使用合適的