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人（Human）結(jié)蛋白（Desmin）ELISA 檢測試劑盒2011/04/20: 本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：Desmin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知Desmin濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將Desmin和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Desmin的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（

免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)2011/04/20: 免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)一、的概述*免疫細(xì)胞化學(xué)（immunocytochemistry,ICC）-是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定細(xì)胞內(nèi)抗原的成分（主要是多肽和蛋白質(zhì)），對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究，稱為～。（一）對抗原和抗體的要求*具有特異性高和親和力強(qiáng)的抗體是實(shí)驗(yàn)成功的首要條件。-對抗體的要求：純度高、比活性強(qiáng)；*高度特異性抗體的獲得，取決于抗原的純度。-對抗原的要求：純度高，免疫原性強(qiáng)，穩(wěn)定無變化。（二）抗原（antig

血清運(yùn)用領(lǐng)域2011/04/19: 血清：離體的血液凝固之后，經(jīng)血凝塊聚縮釋出的液體，即血清。血清可以抗病毒,增強(qiáng)抵抗力血清屬于生物制劑.小牛血清含在離開母體后自身產(chǎn)生的一些代謝物質(zhì)，當(dāng)然也包括一些生長激素，而胎牛血清絕大部分的物質(zhì)來自于母體.血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。而在

微生物學(xué)檢驗(yàn)基本技術(shù)2011/04/18: 隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)及相關(guān)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，各學(xué)科相互交叉和滲透，醫(yī)學(xué)微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)已深入到細(xì)胞、分子和基因水平，許多新技術(shù)、新方法已在臨床微生物實(shí)驗(yàn)室得到廣泛應(yīng)用。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的基本任務(wù)之一是利用微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)，準(zhǔn)確、快速檢驗(yàn)和鑒定臨床標(biāo)本中的微生物，并對引起感染的微生物進(jìn)行耐藥性監(jiān)測，為臨床對感染性疾病診斷、治療、流行病學(xué)調(diào)查及研究等提供科學(xué)依據(jù)。一、微生物形態(tài)學(xué)檢查基本技術(shù)細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查是細(xì)菌檢驗(yàn)的重要方法之一，它是細(xì)菌分類和鑒定的基礎(chǔ)，可根據(jù)其形態(tài)、結(jié)構(gòu)和染色反應(yīng)性等，為進(jìn)一步鑒定提供參

酸堿指示劑變色原理2011/04/14: 酸堿指示劑是一類在其特定的pH值范圍內(nèi)，隨溶液pH值改變而變色的化合物，通常是有機(jī)弱酸或有機(jī)弱堿。當(dāng)溶液pH值發(fā)生變化時(shí)，指示劑可能失去質(zhì)子由酸色成分變?yōu)閴A色成分，也可能得到質(zhì)子由堿色成分變?yōu)樗嵘煞?；在轉(zhuǎn)變過程中，由于指示劑本身結(jié)構(gòu)的改變，從而引起溶液顏色的變化。指示劑的酸色成分或堿色成分是一對共軛酸堿。一、指示劑的變色原理現(xiàn)以弱酸型指示劑（如*）為例，說明酸堿指示劑的變色原理。弱酸型酸堿指示劑在溶液中存在下列平衡：[H+]=KHIn*[HIn]/[In-]HIn表示弱酸的分子，為酸色成分；I

抗體分類2011/04/13: 抗體（antibody）：機(jī)體在抗原物質(zhì)刺激下，由B細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白?？梢哉f，所有抗體都是免疫球蛋白，但并非所有免疫球蛋白都是抗體?？贵w的一般分類：（1）按作用對象，可將其分為抗毒素、抗菌抗體、抗病毒抗體和親細(xì)胞抗體（能與細(xì)胞結(jié)合的免疫球蛋白，如1型變態(tài)反應(yīng)中的lgE反應(yīng)素抗體，能吸附在靶細(xì)胞膜上）。（2）按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能，可將其分為IgG、IgA、IgM、IgE、IgD五類。（3）按與抗原結(jié)合后是否出現(xiàn)可見反應(yīng)，可將其分為：在介質(zhì)參與

蛋白質(zhì)折疊-蛋白質(zhì)折疊與“折疊病”2011/04/11: 人們對由于基因突變造成蛋白質(zhì)分子中僅僅一個(gè)氨基酸殘基的變化就引起疾病的情況已有所了解，即所謂“分子病”，如地中海鐮刀狀紅血球貧血癥就是因?yàn)檠t蛋白分子中第六位的*突變成了頡氨酸。現(xiàn)在則發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)分子的氨基酸序列沒有改變，只是其結(jié)構(gòu)或者說構(gòu)象有所改變也能引起疾病，那就是所謂“構(gòu)象病”，或稱“折疊病”。大家都知道的瘋牛病，它是由一種稱為Prion的蛋白質(zhì)的感染引起的，這種蛋白質(zhì)也可以感染人而引起神經(jīng)系統(tǒng)疾病。在正常機(jī)體中，Prion是正常神經(jīng)活動所需要的蛋白質(zhì)，而致病Prion與正常Prion的一級

凝膠層析2011/04/07: 凝膠過濾層析也稱分子篩層析、排阻層析。是利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用，根據(jù)被分離物質(zhì)的分子大小不同來進(jìn)行分離。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)，多是交聯(lián)的聚糖（如葡聚糖或瓊脂糖）類物質(zhì)，小分子物質(zhì)能進(jìn)入其內(nèi)部，流下來速度慢，而大分子物質(zhì)卻被排除在外部，下來的速度快，當(dāng)一混合溶液通過凝膠過濾層析柱時(shí)，溶液中的物質(zhì)就按不同分子量篩分開了。編輯本段優(yōu)點(diǎn)它的突出優(yōu)點(diǎn)是層析所用的凝膠屬于惰性載體，不帶電荷，吸附力弱，操作條件比較溫和，可在相當(dāng)廣的溫度范圍下進(jìn)行，不需要有機(jī)溶劑，并且對分離成

微生物生長的幾種檢測方法2011/03/31: 摘要：微生物的檢測，無論在理論研究還是在生產(chǎn)實(shí)踐中都具有重要的意義，本文分生長量測定法，微生物計(jì)數(shù)法，生理指標(biāo)法和商業(yè)化快速微生物檢測簡要介紹了利用微生物重量，體積，大小，生理代謝物等指標(biāo)的二十余種常用的檢測方法，簡要介紹了這些方法的原理，應(yīng)用范圍和優(yōu)缺點(diǎn)。概述：一個(gè)微生物細(xì)胞在合適的外界條件下，不斷的吸收營養(yǎng)物質(zhì)，并按自己的代謝方式進(jìn)行新陳代謝。如果同化作用的速度超過了異化作用，則其原生質(zhì)的總量（重量，體積，大小）就不斷增加，于是出現(xiàn)了個(gè)體的生長現(xiàn)象。如果這是一種平衡生長，即各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)

干細(xì)胞2011/03/29: 干細(xì)胞（stemcells,SC）是一類具有自我復(fù)制能力（self-renewing）的多潛能細(xì)胞，在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞。有兩種分類方法，一是根據(jù)所處的發(fā)育階段分為胚胎（embryonicstemcell，ES細(xì)胞）和成體（somaticstemcell）。第二種分類方法是根據(jù)的發(fā)育潛能分為三類：（totipotentstemcell,TSC）、多能（pluripotentstemcell）和單能（unipotentstemcell）。胚胎的發(fā)育等級較高，是，而成體的發(fā)育等級較

293和293T的區(qū)別以及培養(yǎng)條件2011/03/28: 1、來源：293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系，293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生，同時(shí)表達(dá)SV40大T抗原，含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動子區(qū)的質(zhì)?？梢詮?fù)制。用Ca3（PO4）2轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50%。蛋白表達(dá)水平高，轉(zhuǎn)染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達(dá)的蛋白。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞是過表達(dá)蛋白并獲得細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。2、形態(tài)為上皮細(xì)胞，貼壁細(xì)胞，能致瘤。3、染色體核型：亞三倍體人細(xì)胞系。染色體眾數(shù)為64，30%的細(xì)胞有64條染色體。4.2%的細(xì)胞染色體

液相色譜常見問題及處理辦法2011/03/25: 問:用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移，有時(shí)發(fā)生快速變化，原因何在？如何解決？答:關(guān)于漂移問題：1．溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定2．流動相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等3．柱子未平衡好，需對柱子進(jìn)行更長時(shí)間的平衡關(guān)于快速變化問題1．流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設(shè)定流速，使之保持穩(wěn)定2．泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。3．流動相不合適，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合問:色質(zhì)聯(lián)用中毛細(xì)柱的選擇應(yīng)注意什么問題？答:1．柱效要高2

病毒學(xué)研究方法和手段的進(jìn)展2011/03/24: 病毒學(xué)研究方法和手段的進(jìn)展病毒學(xué)的研究初期，由于當(dāng)時(shí)人們在顯微鏡下觀察不到病毒粒體，加之病毒又不能進(jìn)行人工培養(yǎng)，因而分離到病毒對于明確病毒的生物學(xué)特性顯得十分重要。在當(dāng)時(shí)尚無高速離心機(jī)的情況下，人們試圖用馬力離心機(jī)來從病組織中分離病毒。直到高速和超速離心機(jī)問世后，人們才有可能依據(jù)病毒學(xué)性分離和制備病毒。時(shí)至今日，病毒的分離，用專業(yè)術(shù)語來說即病毒的提純，在病毒學(xué)的分子生物學(xué)研究中仍然是關(guān)鍵步驟。1953年，斯坦利*次提取并結(jié)晶了TMV，這是病毒學(xué)*一個(gè)重要的里程碑。以后，人們先后從不同的組織中分離

微生物培養(yǎng)基手冊大全2011/03/21: 微生物培養(yǎng)基手冊大全1、營養(yǎng)瓊脂（普通瓊脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏湯）100毫升瓊脂（視天氣，瓊脂質(zhì)量而定）制法：將上物加熱溶解，補(bǔ)足水，調(diào)ph至7．6，過濾分裝121℃，高壓滅菌15分鐘。用途：作普通瓊脂平皿。2、*（BA）制法：取營養(yǎng)瓊脂（PH7．6），加熱使其溶解待冷至45-50℃，以滅菌操作于每100毫升營養(yǎng)瓊脂加滅菌脫纖維羊血或兔血5-10毫升,輕輕搖勻，立即傾注于平板或分裝試管，制成斜面?zhèn)溆?。用途?．一般棉拭子均接種此培養(yǎng)基。2．尿液，膿液3．分離細(xì)菌標(biāo)本用。3、

植物細(xì)胞工程概述2011/03/15: 所謂細(xì)胞工程，是指以細(xì)胞為基本單位進(jìn)行培養(yǎng)、增殖或按照人們的意愿改造細(xì)胞的某些生物學(xué)特性，從而創(chuàng)造新的生物和物種，以獲得具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的生物產(chǎn)品。它主要由兩部分構(gòu)成，其一是上游工程，包含細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞遺傳操作和細(xì)胞保藏三個(gè)步驟。另一個(gè)則是下游工程，是將已轉(zhuǎn)化的細(xì)胞應(yīng)用到生產(chǎn)實(shí)踐中去，以生產(chǎn)生物產(chǎn)品的過程。顧名思義，植物細(xì)胞工程，當(dāng)然就是針對植物細(xì)胞的細(xì)胞工程了，它是細(xì)胞工程的一個(gè)重要組成部分。自１９０4年Hanning成功培養(yǎng)離體胚以來，伴隨著相關(guān)理論與技術(shù)的飛速發(fā)展，植物細(xì)胞工程也取得了巨大的成

免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色方法2011/03/14: 一、標(biāo)本制作可制作涂片、印片、細(xì)胞單層培養(yǎng)物、組織切片，經(jīng)適當(dāng)固定或不固定，作免疫熒光染色用。二、熒光抗體染色方法（一）直接法1．染色切片經(jīng)固定后，滴加經(jīng)稀釋至染色效價(jià)如1：8或1：16的熒光抗體（如兔抗人γ-球蛋白熒光抗體或兔抗人IgG或IgA熒光抗體等），在室溫或37℃染色30min，切片置入能保持潮濕的染色盒內(nèi)，防止干燥。2．洗片傾去存留的熒光抗體，將切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗兩次，攪拌，每次5min，再用蒸餾水洗1min，除去鹽結(jié)晶。3．用50%緩沖（0.5mol/L碳酸鹽

細(xì)胞因子及其受體的檢測2011/03/11: 細(xì)胞因子在機(jī)體免疫應(yīng)答過程中起著十分重要的作用。在某些疾病時(shí)，體內(nèi)細(xì)胞因子及其受體表達(dá)可發(fā)生異常，與機(jī)體免疫功能低下或發(fā)生病理損傷有關(guān)。因此，在臨床免疫學(xué)中越來越重視對細(xì)胞因子及其受體的檢測。在基礎(chǔ)免疫研究中，常需檢測不同條件培養(yǎng)液中細(xì)胞因子的活性，并探討細(xì)胞因子產(chǎn)生水平與免疫細(xì)胞表型、增殖、殺傷及其它功能的關(guān)系。此外，原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中表達(dá)的重組細(xì)胞因子或經(jīng)過不同工藝純化后的產(chǎn)品需測定其活性和含量。從細(xì)胞因子及其受體檢測的水平來說，可以分為基因組DNA、mRNA和蛋白三個(gè)不同的水平，后者又包

ELISA試劑的臨床質(zhì)量評價(jià)2011/03/10: ELISA試劑的評價(jià)（evaluation）分兩個(gè)方面：一是試劑本身的質(zhì)量評價(jià)，符合一定要求后才能生產(chǎn)供應(yīng)；一是在臨床應(yīng)用中效果的評價(jià)。以肝炎ELISA診斷試劑為例，首先必須通過中國藥品生物制品檢定，以得到生產(chǎn)的許可。檢定內(nèi)容除包裝、標(biāo)簽、說明書等外，對試劑的性能，如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項(xiàng)檢定，通過對一系列參比品的檢測，結(jié)果符合要求者才為合格。ELISA試劑的臨床質(zhì)量評價(jià)是用該試劑對臨床樣本進(jìn)行檢測，以觀察其實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。部臨檢中心對乙肝ELISA診斷試劑在這方面進(jìn)行了工作，通過

三聚氰胺的定義和用途2011/03/09: 1.三聚氰胺的定義三聚氰胺是一種重要的氮雜環(huán)有機(jī)化工原料，目前是重要的尿素后加工產(chǎn)品。三聚氰胺是學(xué)名，別名又稱蜜胺、氰尿酰胺、三聚氰酰胺。2.三聚氰胺的性狀、情況簡介三聚氰胺性狀為純白色單斜晶體。比重1.573（14℃），熔點(diǎn)354℃，沸點(diǎn)升華。略溶于水及乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳。與鹽酸、硫酸、硝酸、乙酸、草酸等都能形成鹽。在中性或微堿性情況下，與甲醛縮合而成各種羥甲基三聚氰胺，但在微酸性中（PH值5.5-6.5）與羥甲基的衍生物進(jìn)行縮聚反應(yīng)而生成樹脂產(chǎn)物。3.三聚氰胺的加工工藝情況（1）國

神經(jīng)干細(xì)胞的應(yīng)用2011/03/09: 神經(jīng)干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)是神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療的一個(gè)里程碑，大部分神經(jīng)缺損是由于疾病或損傷而使神經(jīng)系統(tǒng)中的某些類型細(xì)胞的數(shù)目減少所致，而這些細(xì)胞又不能自我修復(fù)，如神經(jīng)退行性疾病（帕金森?。┖兔撍枨始膊?。由于神經(jīng)干細(xì)胞*的生物學(xué)特性是既在體外的可持續(xù)增殖，又具有多分化的潛能，給人類多年來一直未能解決的使損傷或病變的中樞神經(jīng)組織恢復(fù)相應(yīng)功能的治療難題提供了可能的途徑。目前，神經(jīng)干細(xì)胞在應(yīng)用方面的研究主要集中在以下三個(gè)方面。1用于神經(jīng)細(xì)胞的替代療法從人胎兒全腦分離出神經(jīng)干細(xì)胞并成功地灌注入發(fā)育中的小鼠大腦后，細(xì)胞

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