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人血管內(nèi)皮生長因子ELISA檢測試劑盒2011/05/27
人血管內(nèi)皮生長因子ELISA檢測試劑盒試驗(yàn)原理:VEGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知VEGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將VEGF和*標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中VEGF的濃度呈比例關(guān)系。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要
多肽的溶解和保存2011/05/24
多肽的溶解和保存凍干多肽的溶解多肽溶解中的主要問題是二級結(jié)構(gòu)的形成。雖然疏水肽鏈二級結(jié)構(gòu)的形成更明顯,但除了zui短的肽鏈外,該現(xiàn)象發(fā)生在幾乎所有肽鏈,與極性無關(guān)。因此,溶解多肽的*個原則是用無菌的蒸餾水或去離子水(如果條件允許則用無氧水)。多肽溶液可能遇到細(xì)菌降解。為避免該現(xiàn)象的發(fā)生,多肽應(yīng)溶解在無菌的蒸餾水中,或者用0.45或0.2µm孔徑的濾膜過濾除菌。包含Cys、Met、Trp的多肽特別容易氧化,因此應(yīng)該溶于無氧的水中。無氧水可以通過注入惰性氣體(氮、氦、氬)減壓除氣得到。若多肽不溶于純
一抗的選擇2011/05/18
檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體,需要考慮如下幾種因素:分析試驗(yàn)應(yīng)用的類型l樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)l樣本的種屬l抗體宿主的種類l抗體的標(biāo)記和檢測l1.分析試驗(yàn)應(yīng)用的類型一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過適用于何種分析類型,如:可以應(yīng)用于WBIHCICCELASA分析等,如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,而僅是說明尚未經(jīng)過此種分析試驗(yàn)驗(yàn)證,如果抗體不適用某些分析試驗(yàn),則會在抗體說明書上標(biāo)注出來不適于某分析試驗(yàn)。
大鼠白介素17(IL-17)酶聯(lián)免疫使用說明書2011/05/17
大鼠白介素17(IL-17)酶聯(lián)免疫注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n
選擇動物*的方法2011/05/16
選擇動物*的方法人的血液和動物血液很多形態(tài)都不同的,簡單的例子,很多動物的紅細(xì)胞有核,人血紅細(xì)胞有核的很少,同劑量同濃度的溶血劑可以*破壞人血紅細(xì)胞但對某些動物血卻無能為力,那么就會再白細(xì)胞的lym前出現(xiàn)大量的影子圖形,會造成一些靜態(tài)界標(biāo)的設(shè)備白細(xì)胞計數(shù)假性增高,甚至影子細(xì)胞與lym重疊,造成單項(xiàng)分類偏高。如果改變?nèi)苎獎舛然蛘邉┝浚敲窗准?xì)胞的破壞也會變得明顯,這樣就會造成分類嚴(yán)重不準(zhǔn)確。其實(shí),就動物學(xué)來講,計數(shù)和分類的準(zhǔn)確還是以五分類為標(biāo)準(zhǔn),三分類確實(shí)很勉為其難的。就儀器本身來說沒有區(qū)別的,
DTT 二硫蘇糖醇2011/05/13
DTT二硫蘇糖醇二硫蘇糖醇(Dithiothreitol,簡稱為DTT)是一種小分子有機(jī)還原劑,化學(xué)式為C4H10O2S2。其還原狀態(tài)下為線性分子,被氧化后變?yōu)榘蜴I的六元環(huán)狀結(jié)構(gòu)。二硫蘇糖醇的名字衍生自蘇糖(一種四碳單糖)。DTT的異構(gòu)體為二硫赤糖醇(DTE),即DTT的C3-差向異構(gòu)體。還原性DTT是一種很強(qiáng)的還原劑,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)(含二硫鍵)的構(gòu)象穩(wěn)定性。它的氧化還原電勢在pH為7時為-0.33伏。二硫蘇糖醇對一個典型的二硫鍵的還原是由兩步連續(xù)的巰基-二硫鍵交
細(xì)胞培養(yǎng)基本條件2011/05/12
細(xì)胞培養(yǎng)基本條件1合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長增殖的zui重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2血清目前,大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清.血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中zui重要的成分之一,含有細(xì)胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。3無菌無毒細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細(xì)胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件.在體外培養(yǎng)的細(xì)胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染,或者自身代謝物質(zhì)積累
淋球菌培養(yǎng)和藥敏2011/05/11
淋球菌培養(yǎng)和藥敏1.標(biāo)本采集:用含無菌生理鹽水的藻酸鈣棉試子,伸入男性尿道2~4cm,輕輕轉(zhuǎn)動取出分泌物;女性先用無菌的脫脂棉擦去陰道內(nèi)粘液,用無菌的藻酸鈣脫脂棉試子插入宮頸內(nèi)1~2cm處旋轉(zhuǎn)取出分泌物;患結(jié)膜炎的新生兒取結(jié)膜分泌物;全身性淋病時可取關(guān)節(jié)液或關(guān)節(jié)穿刺液;前列腺炎患者經(jīng)按摩取前列腺液。2.標(biāo)本立即接種于血瓊脂或巧克力瓊脂平板上,置于含5%~10%的CO2孵箱,37℃孵育24~48小時后觀察結(jié)果。挑選可疑菌落作涂片染色鏡檢??捎醚趸冈囼?yàn)或糖發(fā)酵試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步行抗生
藥物分析的幾種方法2011/05/10
藥物分析的方法一、酸堿滴定法酸堿滴定法:利用酸和堿在水中以質(zhì)子轉(zhuǎn)移反應(yīng)為基礎(chǔ)的滴定分析方法。(1)強(qiáng)酸滴定強(qiáng)堿:如NaOH滴定HCl一般濃度以0.1000mol/l,突躍范圍4.3-9.7,指示劑:*、甲基紅、甲基橙(2)強(qiáng)堿滴定弱酸:如NaOH滴定HAc,突躍范圍PH7.74-9.7,計量點(diǎn)PH8.72.選堿性范圍指示劑*、百里*。不能用酸性指示劑甲基紅,甲基橙。(3)強(qiáng)酸滴定弱堿:HCl滴定NH.HO,PH6.24-4.3,計量點(diǎn)PH5.28,選甲基紅、溴甲酚綠。(4)強(qiáng)堿滴定多元酸:兩個計
人體缺酶的原因2011/05/09
人體缺酶的原因目前的問題是現(xiàn)代人體內(nèi)缺酶的現(xiàn)象普遍嚴(yán)重,人群中十有六七的體中酶量不足。對此,概括了三個主要的原因:原因一:生食生食物中含有必需的消化酶,但酶在高溫烹調(diào)下或加工儲運(yùn)過程中容易喪失活性,由于人們大都以熟食為主,使得食物中原有的酶遭受破壞,而不得不消耗體內(nèi)天然的酶儲備。另外,有些水果中酶含量zui高的部位卻是在人們所不吃的果皮和果莖中,以及在未成熟的苦澀的果汁中,這也是造成人體酶量缺乏的因素所在。原因二:老化人的一生當(dāng)中體內(nèi)生成的酶是有限的,隨著年齡的增長,體內(nèi)分泌的酶從旺盛變得不足。
癌細(xì)胞產(chǎn)生的原因2011/05/05
癌細(xì)胞產(chǎn)生的原因癌細(xì)胞的內(nèi)外潛藏著自身無法克服和無法排除的逆轉(zhuǎn)因素,這是它的特點(diǎn),也是它的缺點(diǎn),造就了它的不穩(wěn)定性?!窘M成】1、在細(xì)胞膜上癌細(xì)胞的生存和發(fā)展離不開蛋白質(zhì)的合成,然而,癌細(xì)胞在合成蛋白質(zhì)時,則必須從健康細(xì)胞中奪取*,可是,與*共生的*酶卻能控制癌細(xì)胞的生長,這是它無法克服的*個矛盾。在大量的科學(xué)驗(yàn)證明,人體內(nèi)每個細(xì)胞的細(xì)胞膜上存在著一種C-Amp(環(huán)式磷酸腺苷)的物質(zhì),這種物質(zhì)是控制或調(diào)整細(xì)胞新陳代謝的主要成份(并不因?yàn)榘┗В?,有趣的是C-Amp還有一個zui顯著的能力,就是
用干細(xì)胞醫(yī)療常識調(diào)節(jié)肌營養(yǎng)不良的癥狀2011/05/04
用干細(xì)胞醫(yī)療常識調(diào)節(jié)肌營養(yǎng)不良的癥狀患有肌營養(yǎng)不良的患者在治療的同時也要配合飲食的調(diào)理?;居腥c(diǎn):飲食宜高蛋白,富含維生素、鈣、鋅、瘦肉、雞蛋、魚、蝦仁、動物肝臟、排骨、木耳、蘑菇、豆腐、黃花菜等可適當(dāng)多食,少吃或忌食過辣、過咸、生冷等不宜消化和有刺激性食品;飲食有節(jié),不要過胖;禁忌煙酒。
體液免疫功能的檢測2011/05/03
體液免疫功能的檢測疫球蛋白的定量檢測1.血清免疫球蛋白的測定血清免疫球蛋白(Ig)的測定是檢查體液免疫功能zui常用的方法。由于目前還沒有發(fā)現(xiàn)由IgD和IgE缺陷所致疾病,所以通常檢測IgG、IgM、IgA,這三類Ig就可以代表血清Ig的水平(表20-2)。檢測發(fā)現(xiàn)三類Ig水平均明顯低下,就可考慮體液免疫缺陷。但在分析兒免疫細(xì)胞童Ig水平時,應(yīng)注意Ig的水平隨年齡而變化。體液免疫功能缺陷首先考慮患者血清Ig水平,如果所有類別Ig水平均降低,即稱為一般性聯(lián)低丙種球蛋白血癥。如果免疫球蛋白水平極度低
細(xì)胞培養(yǎng)2011/04/29
細(xì)胞培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)1.直接觀察活細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動。用于細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)和腫瘤學(xué)等多種學(xué)科研究.2.直接觀察細(xì)胞的變化可便于攝影。3.研究細(xì)胞種類如低等到高等到人類、胚胎到成體、正常組織到腫瘤。4.便于使用各種技術(shù):相差、熒光、電鏡、組化、同位素標(biāo)記等方法觀察和研究細(xì)胞狀況。5.是分子生物學(xué)和基因工程學(xué)的研究對象,也是其主要的組成部分。6.易于施用物理、化學(xué)生物的實(shí)驗(yàn)研究。7.易于提供大量生物性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象,耗資少比較經(jīng)濟(jì)。8.成為生物制品單克隆抗體生產(chǎn)和基因工程等的材料來源
*的正確使用2011/04/28
*的正確使用*輕薄柔軟、親膚性強(qiáng),具有高彈性、高透氣性、防水、粘性適中、術(shù)中無脫落等特點(diǎn),zui大程度地防止消毒部位被感染,且術(shù)后剝離時不留殘膠,節(jié)省了清理所需的時間。產(chǎn)品性能1、透明:薄膜超薄、高透明,可清晰觀察手術(shù)部位。2、透氣:不影響皮膚的正常呼吸,防止薄膜下水汽積聚,減少感染,為手術(shù)切口周圍提供一個無菌環(huán)境。3、防水防菌:能防止水、細(xì)菌及污垢侵入傷口,可有效抑制細(xì)菌在術(shù)中游移。4、高彈性:能順應(yīng)人體輪廓曲線貼敷,固定可靠。低致敏、粘性適中、不刺激皮膚,易揭除。產(chǎn)品用途術(shù)前、術(shù)中手術(shù)部位的
孕馬血清腺激素的生物學(xué)測定2011/04/27
孕馬血清腺激素的生物學(xué)測定一.實(shí)驗(yàn)特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)類型:設(shè)計型實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)類別:專業(yè)基礎(chǔ)課計劃學(xué)時:4學(xué)時每組人數(shù):4~5人二.實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊笊飳W(xué)測定法是根據(jù)一些動物的靶器官和靶組織對激素反應(yīng)程度來測定激素含量的方法,是zui早應(yīng)用于激素測定的經(jīng)典方法,能夠直接反應(yīng)激素的生物活性,也稱作激素的生物學(xué)效價,其它的測定方法往往以此種方法加以驗(yàn)證。要求學(xué)生通過孕馬血清*的活性測定,掌握激素的生物學(xué)測定方法。三.實(shí)驗(yàn)原理PMSG的生物學(xué)測定法是以即將達(dá)到性成熟或摘除垂體的小鼠或大鼠,注射含有待測激素樣品后,觀察其子
高血壓20102011/04/26
關(guān)鍵詞一:適度降壓鑒于高危人群(高齡老年,有大血管疾病的患者)容易出現(xiàn)降壓后的J-Curve現(xiàn)象,因此,目前高血壓的治療目標(biāo)并不是血壓越低越好,適度降壓更適用高危患者。2010年,不同的會議上,各國都在強(qiáng)調(diào)本國目前的血壓目標(biāo)。即一般高血壓患者血壓仍如何解釋這些現(xiàn)象?在2010年發(fā)表的多個研究中,通過回顧以往高危人群的臨床試驗(yàn),可用降壓出現(xiàn)的J形曲線現(xiàn)象來部分解釋。包括VALUE研究、FVERE研究、TNT研究的Meta分析顯示,當(dāng)收縮壓2010年美國心臟病學(xué)院(ACC)年會公布了ACCODE和I
PCR反應(yīng)的五要素2011/04/25
1、引物引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸
大鼠(rat)I型膠原(Collagen Type I)2011/04/20
本試劑盒僅供研究使用標(biāo)本:細(xì)胞上清液一、試劑組成精密度微孔板96孔(MicrotitrationStrips)1塊2~8℃干燥保存酶標(biāo)偶合液(Conjugate)1瓶12.0毫升2~8℃冷藏保存標(biāo)準(zhǔn)品(Standard)5瓶各1.0毫升2~8℃冷藏保存呈色劑A(SubstrateA)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存呈色劑B(SubstrateB)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存終止液(StoppingSolution)1瓶6.0毫升室溫保存20倍濃縮洗滌液(RinsingBufferx20)
細(xì)胞培養(yǎng)常見問題解答2011/04/20
1放置在冰箱中的培養(yǎng)基顏色會發(fā)生變化,為什么?答:培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中酸堿指示劑(通常為phenolred)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿后再用于細(xì)胞培養(yǎng)將造成細(xì)胞生長停滯或死亡。培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾的CO2,以調(diào)整pH值。2什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?答:酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響,可以通過純化技術(shù)去除,但酚紅在無血清培養(yǎng)基
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