【儀表網(wǎng) 行業(yè)標準】 由國家糧食和物資儲備局組織起草的《糧油檢驗 谷物中黃曲霉毒素 B1測定 超導量點免疫熒光快速定量法》標準已形成征求意見稿，現(xiàn)向社會公開征求意見，截止日期為2023年7月19日。意見反饋郵箱：tc270sc1@ags.ac.cn。
 

　　黃曲霉毒素 B1是已知的化學物質(zhì)中致癌性最強的一種。黃曲霉毒素 B1對人和動物具有強烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害。在天然食物中以黃曲霉毒素 B1最為多見，危害性也最強，是大部分食品的必檢項目之一。
 

　　糧食作為我國飲食結(jié)構(gòu)金字塔最底端，在我國居民飲食結(jié)構(gòu)中所占比例最高，其質(zhì)量安全更是不容小覷。然而，糧食真菌毒素污染事件時有發(fā)生，據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織估計，全世界谷物供應 25%受真菌毒素污染而不能食用，其中又以黃曲霉毒素污染最為嚴重。因此，大力發(fā)展準確、高效的黃曲霉毒素快速檢測技術(shù)，提高糧食黃曲霉毒素的監(jiān)管時效性，對把好糧食市場準入關(guān)，確保糧食流通安全具有重要現(xiàn)實意義。
 

　　在當前綠色、安全的糧食發(fā)展背景下，糧食污染物快速檢測技術(shù)是糧食行業(yè)的發(fā)展重點，各種快速檢測方法紛紛涌現(xiàn)，為糧食安全的保駕護航發(fā)揮了重要作用。為確保方法使用的合法性，將這些快速檢測方法進行嚴謹?shù)尿炞C并形成方法標準符合當前政策和形勢，也符合社會需求。目前，已形成標準的真菌毒素快速檢測方法主要是酶聯(lián)免疫法和膠體金快速定量法，尚不足以完全滿足當前行業(yè)對真菌毒素快速檢測技術(shù)的需求。本項目以超導量點免疫熒光技術(shù)為基礎(chǔ)，利用超導量點的增敏作用，有效提高了黃曲霉毒素 B1的檢測靈敏度和準確性。同時，該方法對樣品前處理方法進行優(yōu)化，結(jié)合該方法測定樣品時較短的上機時間，大大縮短了樣品的檢測時間，提高了樣品的檢測效率。該方法形成標準將為糧食黃曲霉素 B1的監(jiān)管準確性和時效性發(fā)揮重要作用。
 

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020《標準化工作導則 第 1 部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
 

　　本文件規(guī)定了谷物中黃曲霉毒素B1的超導量點免疫熒光快速定量檢測方法的原理、試劑、儀器設(shè)備及材料、樣品制備、樣品測定、結(jié)果表述、重復性。本文件適用于小麥、稻谷、玉米等谷物及其制品中黃曲霉毒素B1的快速定量檢測。方法檢出限為0.5μg/kg，定量限為1.5μg/kg。
 

　　原理：
 

　　本方法基于超導量點標記的抗原抗體反應，采用熒光側(cè)向免疫層析(Fluorescent Lateral Flow，F(xiàn)LF)方法學原理。試樣中的黃曲霉毒素B1抗原和固定在檢測線T線上的黃曲霉毒素B1抗原與超導量點標記黃曲霉毒素B1抗體競爭反應，熒光分析儀讀取的熒光信號與試樣中黃曲霉毒素B1含量呈反比，根據(jù)儀器內(nèi)置曲線自動計算樣品中黃曲霉毒素B1的含量。
 

　　儀器設(shè)備及材料：
 

　　除實驗室常規(guī)儀器、設(shè)備外，需用到下列儀器設(shè)備。
 

　　1.天平：分度值 0.01g。
 

　　2.粉碎機：可使試樣粉碎后全部通過20目篩。
 

　　3.離心機：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。
 

　　4.渦旋振蕩器。
 

　　5.免疫熒光分析儀：可測定并顯示超導量點免疫熒光定量檢測卡的測定結(jié)果。
 

　　6.QD-Infinity 黃曲霉毒素 B1超導量點免疫熒光定量檢測卡1：常溫避光儲存，具體儲存條件參照使用說明；技術(shù)要求見附錄 A。
 

　　7.濾紙：中速定量濾紙。
 

　　8.計時器。
 

　　樣品測定：
 

　　1.開啟免疫熒光分析儀(5.5)。
 

　　2.將超導量點免疫熒光定量檢測卡(5.6)從冷藏狀態(tài)取出放置至室溫，加樣孔朝上平放。
 

　　3.準確移取 75 μL 待測液(6.2.2)，加入檢測卡加樣孔中。
 

　　4.檢測卡加樣后，水平靜置反應15min，然后在3min 內(nèi)將檢測卡插入免疫熒光分析儀(5.5)，儀器將自動進行檢測。
 

　　5.免疫熒光分析儀(5.5)自動完成數(shù)據(jù)讀取、分析、顯示并保存檢測結(jié)果。
 

　　若顯示值>50μg/kg，則移取100μL6.2.2 中濾液或上清液，加入300μL 試樣提取液(4.2)，充分混勻后取100μL 至一潔凈的離心管中，加入400μL 稀釋緩沖液(4.1)，充分混勻，按照8.2～8.5進行測定。
 

　　結(jié)果表述：
 

　　試樣中黃曲霉毒素B1的含量由免疫熒光分析儀自動計算并顯示，單位為微克每千克(μg/kg)。
 

　　重復性：
 

　　在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不超過算術(shù)平均值的20%。
 

　　更多詳情請見附件。