食用油黃曲霉B1（AFB1）ELISA檢測試劑盒

使用說明書

（貨號：Ounuo92001）

食用油黃曲霉B1檢測試劑盒，本產(chǎn)品可以采用單點定標，即點1個標準品實現(xiàn)定量分析，可實現(xiàn)47個樣本的檢測。采用單點定標時，數(shù)據(jù)分析請來電索取專門的Excel數(shù)據(jù)分析軟件

1. 樣本前處理（植物油脂、花生餅、花生粕）

需要但未提供的試劑和器皿如下：

(1)    無水甲醇，分析純

(2)    正己烷，分析純

(3)    二甲基亞砜，分析純

(4)    去離子水（可用娃哈哈純凈水代替）

試劑配制

樣本提取液：量取無水甲醇350mL，加去離子水150mL混勻備用

植物油脂

1）稱取1.0±0.01g油樣于10mL離心管中，加入5mL樣本提取液，2500rpm渦旋振蕩5min；

2）2600g離心力，離心3min；

3）取步驟2）上層溶液0.2mL，加入0.4mL樣本稀液Ⅰ，再加入0.9mL正己烷，渦旋混勻10-30s（精煉油10s，基質復雜的油可延長至30s），靜置分層，棄上層，取下層溶液用于檢測。

樣本稀釋倍數(shù)：1

花生餅、花生粕

1）稱取2.0±0.01g樣本于50mL離心管中，加入6mL去離子水，2500rpm渦旋振蕩3min，再加入12mL無水甲醇和2mL二甲基亞砜，2500rpm渦旋振蕩5min；

2）2600g離心力，離心3min；

3）取步驟2）上層溶液0.2mL，加入0.4mL樣本稀液Ⅰ，渦旋混勻；

4）取步驟3）下層溶液0.05mL，加入0.45mL樣本稀液Ⅱ，渦旋混勻，待檢測。

樣本稀釋倍數(shù)：20

2. 操作步驟

實驗前，請將檢測試劑盒從2-8℃冰箱中取出，于室內(nèi)溫度20-28℃下平衡1小時！

試劑配制

洗滌液（1×）：取1體積的20×濃縮洗液，加入19體積的去離子水或蒸餾水混勻，備用，可按需配制

1）取出適量平衡后的板條，其余放回鋁膜袋中；

2）依次加50μL標準品/樣本于相應微孔中；加50μL酶結合物和50μL抗體至所有微孔；輕敲板架；

3）蓋上板貼，于20-28℃條件下孵育15分鐘；倒出微孔中液體；

4）將洗滌液注滿微孔浸泡15s倒出，重復4次，共計5次；并于拍板布上盡可能干的拍出孔內(nèi)液體；

5）加100μL底物至微孔中，輕敲板架，蓋上板貼，于20-28℃下，孵育5分鐘；

6）揭開板貼，不要倒出液體，直接加100μL終止液至微孔中，輕敲板架，于450/630nm波長下，讀數(shù)。

3. 結果分析

1）結果計算將檢測的吸光度值輸入到配套計算軟件的相應位置即可計算出樣本中黃曲霉B1的含量。2）超出檢測上限的樣本稀釋方法① 將樣本前處理步驟“3）”中的待測溶液再用樣本稀液Ⅱ，稀釋至曲線范圍內(nèi)后再繼續(xù)后續(xù)操作；② 將得出的含量再乘以相應地稀釋倍數(shù)，即為最終樣本中黃曲霉B1的含量。

食用油黃曲霉B1檢測試劑盒