植物油黃曲霉B1 ELISA檢測試劑盒

使用說明書

（貨號：Ounuo92001）

植物油黃曲霉B1 ELISA檢測試劑盒，本產(chǎn)品可以采用單點定標，即點1個標準品實現(xiàn)定量分析，可實現(xiàn)47個樣本的檢測。采用單點定標時，數(shù)據(jù)分析請來電索取專門的Excel數(shù)據(jù)分析軟件

1. 樣本前處理（植物油脂、花生餅、花生粕）

需要但未提供的試劑和器皿如下：

(1)    無水甲醇，分析純

(2)    正己烷，分析純

(3)    二甲基亞砜，分析純

(4)    去離子水（可用娃哈哈純凈水代替）

試劑配制

樣本提取液：量取無水甲醇350mL，加去離子水150mL混勻備用

植物油脂

1）稱取1.0±0.01g油樣于10mL離心管中，加入5mL樣本提取液，2500rpm渦旋振蕩5min；

2）2600g離心力，離心3min；

3）取步驟2）上層溶液0.2mL，加入0.4mL樣本稀液Ⅰ，再加入0.9mL正己烷，渦旋混勻10-30s（精煉油10s，基質(zhì)復(fù)雜的油可延長至30s），靜置分層，棄上層，取下層溶液用于檢測。

樣本稀釋倍數(shù)：1

花生餅、花生粕

1）稱取2.0±0.01g樣本于50mL離心管中，加入6mL去離子水，2500rpm渦旋振蕩3min，再加入12mL無水甲醇和2mL二甲基亞砜，2500rpm渦旋振蕩5min；

2）2600g離心力，離心3min；

3）取步驟2）上層溶液0.2mL，加入0.4mL樣本稀液Ⅰ，渦旋混勻；

4）取步驟3）下層溶液0.05mL，加入0.45mL樣本稀液Ⅱ，渦旋混勻，待檢測。

樣本稀釋倍數(shù)：20

2. 操作步驟

實驗前，請將檢測試劑盒從2-8℃冰箱中取出，于室內(nèi)溫度20-28℃下平衡1小時！

試劑配制

洗滌液（1×）：取1體積的20×濃縮洗液，加入19體積的去離子水或蒸餾水混勻，備用，可按需配制

1）取出適量平衡后的板條，其余放回鋁膜袋中；

2）依次加50μL標準品/樣本于相應(yīng)微孔中；加50μL酶結(jié)合物和50μL抗體至所有微孔；輕敲板架；

3）蓋上板貼，于20-28℃條件下孵育15分鐘；倒出微孔中液體；

4）將洗滌液注滿微孔浸泡15s倒出，重復(fù)4次，共計5次；并于拍板布上盡可能干的拍出孔內(nèi)液體；

5）加100μL底物至微孔中，輕敲板架，蓋上板貼，于20-28℃下，孵育5分鐘；

6）揭開板貼，不要倒出液體，直接加100μL終止液至微孔中，輕敲板架，于450/630nm波長下，讀數(shù)。

3. 結(jié)果分析

1）結(jié)果計算將檢測的吸光度值輸入到配套計算軟件的相應(yīng)位置即可計算出樣本中黃曲霉B1的含量。2）超出檢測上限的樣本稀釋方法① 將樣本前處理步驟“3）”中的待測溶液再用樣本稀液Ⅱ，稀釋至曲線范圍內(nèi)后再繼續(xù)后續(xù)操作；② 將得出的含量再乘以相應(yīng)地稀釋倍數(shù)，即為最終樣本中黃曲霉B1的含量。

食用油黃曲霉B1檢測試劑盒