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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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腫瘤細(xì)胞在骨髓中再造胰腺功能2017/09/12
這個(gè)研究團(tuán)隊(duì)利用腫瘤細(xì)胞修改了針對(duì)1型糖尿病患者的胰島移植程序。他們從捐贈(zèng)者的胰腺中提取內(nèi)分泌細(xì)胞,植入患者的盆骨骨髓中,“再造”部分胰腺功能。目前,研究團(tuán)隊(duì)已經(jīng)在4位胰腺全部切除的糖尿病患者身上進(jìn)行了臨床試驗(yàn),經(jīng)過(guò)3年觀察,植入的內(nèi)分泌組織在患者骨髓中“扎根并工作”。一個(gè)意大利研究團(tuán)隊(duì)日前宣布,他們嘗試在骨髓中部分再造胰腺功能獲得成功,這將有助于糖尿病患者在胰腺切除手術(shù)后提高生活質(zhì)量、降低并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)。出版的學(xué)術(shù)期刊《糖尿病》刊登了這一發(fā)現(xiàn)。通常情況下,部分糖尿病患者胰腺被摘除后,由于來(lái)自胰腺的
如何拯救復(fù)活耗竭后的人源細(xì)胞 ?2017/09/07
人源細(xì)胞是免疫系統(tǒng)與病毒和癌細(xì)胞等作戰(zhàn)的主力,它們喪失功能稱為T(mén)細(xì)胞耗竭,會(huì)使機(jī)體免疫力下降、病原體獲得優(yōu)勢(shì)。一些免疫療法能鼓舞T細(xì)胞重新參戰(zhàn),但對(duì)*耗竭的T細(xì)胞不起作用,導(dǎo)致免疫療法對(duì)許多患者無(wú)效,或病情緩解后又復(fù)發(fā)。美國(guó)圣祖德兒童研究醫(yī)院的科學(xué)家在新一期美國(guó)《細(xì)胞》雜志上報(bào)告說(shuō),他們發(fā)現(xiàn)免疫T細(xì)胞*耗竭與DNA甲基化過(guò)程有關(guān),一種現(xiàn)成的癌癥*藥物可以讓T細(xì)胞重新振作起來(lái)。DNA甲基化是指DNA的構(gòu)成單元之一胞嘧啶被選擇性地添加甲基,這會(huì)使DNA鏈條外形發(fā)生變化,導(dǎo)致一些蛋白質(zhì)無(wú)法正確識(shí)別DN
揭示意想不到的人源細(xì)胞來(lái)源2017/09/05
人源細(xì)胞發(fā)育通常被認(rèn)為是一條單行道。干細(xì)胞可生成一些細(xì)胞,它們會(huì)發(fā)育成為諸如組成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞一類(lèi)的特定細(xì)胞類(lèi)型,但卻不應(yīng)該發(fā)生逆轉(zhuǎn)。而現(xiàn)在研究人員發(fā)現(xiàn),在一個(gè)非常令人驚訝的地方——牙齒內(nèi)神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榱烁杉?xì)胞。這一出人意料的干細(xì)胞來(lái)源有可能為科學(xué)家們提供一個(gè)新的起點(diǎn),在不利用胚胎的情況下培育出滿足治療或研究需要的人類(lèi)組織。研究人員說(shuō):“其應(yīng)用不于牙科學(xué),這一研究發(fā)現(xiàn)可產(chǎn)生非常廣泛的影響。這些干細(xì)胞還可以用于再生軟骨和骨骼。”過(guò)去研究人員知道牙齒中心柔軟的“牙髓”中含有一個(gè)小
培養(yǎng)人源細(xì)胞的凍存的分析2017/08/31
人源細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。1.凍存細(xì)胞(1)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染),在凍存前1d換液。(2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計(jì)數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×107/ml左右密度,離心,去上清。(3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO1ml,5.6%NaHCO30.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保
干細(xì)胞培養(yǎng)之“收到細(xì)胞的處理方式”2017/08/29
冷凍干細(xì)胞解凍程序:2.1.依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類(lèi)、血清種類(lèi)和其它之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類(lèi),若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。2.2.FBS(fetalbovineserum,胚牛血清),CS(calfserum,小牛血清)和HS(horseserum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單之血清種類(lèi)培養(yǎng)之。2.3.將潔特培養(yǎng)基置于37C水槽中回溫
人源細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)大總結(jié)2017/08/24
人源細(xì)胞在單純的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中不能存活,在特殊類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)中必須提供某些痕量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生長(zhǎng)因子才能使細(xì)胞得以生長(zhǎng)并維持生長(zhǎng)狀態(tài)?;A(chǔ)培養(yǎng)基常常要添加血清,血清終濃度多為5~20%。特殊用途的血清來(lái)源須用經(jīng)驗(yàn)確定,廣泛應(yīng)用的血清種類(lèi)有馬血清與胎牛血清。胎牛血清中富含有絲分裂因子,常選其作增殖細(xì)胞用的血清,也用于細(xì)胞系和原代培養(yǎng)。而馬血清常常用來(lái)作有絲分裂后的神經(jīng)元培養(yǎng)。然而,很多人也將胎牛血清用于神經(jīng)元培養(yǎng),也有人用馬血清來(lái)培養(yǎng)膠質(zhì)細(xì)胞。用大鼠進(jìn)行神經(jīng)元培養(yǎng)的某些研究者喜歡使用同型血清;人類(lèi)的胎盤(pán)
ATCC細(xì)胞傳代后多久能轉(zhuǎn)染?2017/08/22
常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)室ATCC細(xì)胞傳代方法有貼壁細(xì)胞用消化法傳代和懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞采用離心分離后傳代。貼壁細(xì)胞消化時(shí),因細(xì)胞對(duì)*的敏感程度不同,所以消化時(shí)間差別較大。對(duì)于初學(xué)者,消化的程度也很難掌握好,加入適量*,輕輕搖晃3-4次(使細(xì)胞充分與*接觸),隨即吸取*,放于培養(yǎng)箱消化,數(shù)分鐘后取出,輕拍培養(yǎng)瓶,見(jiàn)細(xì)胞自瓶壁滑下即可,若沒(méi),繼續(xù)消化。細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)的細(xì)胞,接種于培養(yǎng)板,加培養(yǎng)液,培養(yǎng)過(guò)夜(細(xì)胞長(zhǎng)至85-90%滿);按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。轉(zhuǎn)染時(shí)應(yīng)注意預(yù)備脂質(zhì)體/DNA混合物必須在無(wú)血清下進(jìn)行
實(shí)驗(yàn)室制備的人源細(xì)胞為何會(huì)失???2017/08/17
誘導(dǎo)多能人源細(xì)胞為再生醫(yī)學(xué)帶來(lái)了希望,因?yàn)閺睦碚撋险f(shuō),它們可以變成任何類(lèi)型的組織,并且,因?yàn)樗鼈兪怯刹∪俗陨淼某扇思?xì)胞制成,因此保證了兼容性。然而,將成人細(xì)胞變成這些iPS細(xì)胞的技術(shù),并非*,在恢復(fù)它們的多能狀態(tài)之后,這些細(xì)胞并不總是能正確地分化恢復(fù)到成年細(xì)胞?,F(xiàn)在,研究人員發(fā)現(xiàn)了其中一個(gè)原因:逆轉(zhuǎn)過(guò)程并不總是*捕獲一個(gè)細(xì)胞的基因組被折疊進(jìn)其細(xì)胞核的方式。這個(gè)折疊結(jié)構(gòu)直接影響基因的表達(dá),從而影響細(xì)胞的功能。這項(xiàng)新的研究表明,當(dāng)前技術(shù)可能不會(huì)產(chǎn)生相當(dāng)于胚胎中發(fā)現(xiàn)的多能干細(xì)胞那樣的iPS細(xì)胞,因?yàn)橐?
干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為血液細(xì)胞的步驟2017/08/15
研究人員在干細(xì)胞成為血液細(xì)胞的過(guò)程中(該過(guò)程稱為造血作用),發(fā)現(xiàn)以前未被發(fā)現(xiàn)的步驟。一個(gè)研究組,包括溫斯洛普教授溫迪·埃伯,已經(jīng)建立了一個(gè)非常復(fù)雜的一系列事件確定血液祖細(xì)胞群密切相關(guān)的命運(yùn)。埃伯教授,這項(xiàng)研究的一個(gè)共同作者,是西澳大利亞州大學(xué)病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)學(xué)院的負(fù)責(zé)人。這項(xiàng)研究,是大型藍(lán)圖研究項(xiàng)目中用于了解血液疾病的一部分,識(shí)別血液細(xì)胞類(lèi)型之間的基因表達(dá)的成千上萬(wàn)的差異。這些差異導(dǎo)致了許多特定事件,這些事件在血液正常發(fā)育中起著至關(guān)重要的作用。在這個(gè)過(guò)程中出錯(cuò)可能會(huì)導(dǎo)致血液疾病,包括白血病。相
腫瘤細(xì)胞的傳代經(jīng)驗(yàn)2017/08/10
腫瘤細(xì)胞放在顯微鏡下觀察,細(xì)胞無(wú)污染、退縮,等其長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶約70%-80%時(shí)即可進(jìn)行傳代操作,具體步驟如下:1、打開(kāi)瓶蓋,棄上清,2.D-HANK‘S夜(以50ml培養(yǎng)瓶為例,下同)2、吸管清洗后棄之;3、加0.25%*2吸管;4、輕搖晃后置入37度溫箱;5、3-5分鐘后置顯微鏡下觀察,見(jiàn)細(xì)胞胞質(zhì)退縮,變圓;6、吸去*,加含10%FCS的RPMI16403吸管;7、用洗管吹打,見(jiàn)細(xì)胞脫落,培養(yǎng)液變混,即可吸出加到新的培養(yǎng)瓶中。腫瘤細(xì)胞注意事項(xiàng):若*消化超過(guò)時(shí)間,見(jiàn)細(xì)胞已漂浮,切不可直接倒去上清,
如何培養(yǎng)干細(xì)胞2017/08/08
人類(lèi)多能干細(xì)胞(hPSC)包括胚胎干細(xì)胞(hESC)和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(hiPSC),是再生醫(yī)學(xué)和藥物研發(fā)的重要細(xì)胞資源。過(guò)去十年來(lái),人們開(kāi)發(fā)了各種各樣的hPSC培養(yǎng)方法。對(duì)不同培養(yǎng)方法和培養(yǎng)成分進(jìn)行了比較,分析了它們的優(yōu)點(diǎn)和劣勢(shì)。此外,還探討了hPSC培養(yǎng)的注意事項(xiàng)、面臨的挑戰(zhàn)和未來(lái)的方向,以便人們能夠更好的擴(kuò)增、分化和使用hPSC。過(guò)去十年來(lái),為了滿足再生醫(yī)學(xué)和藥物研發(fā)的緊迫需求,hPSC培養(yǎng)技術(shù)發(fā)展得很快。盡管如此我們?nèi)匀幻媾R著許多挑戰(zhàn),比如標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)方案和細(xì)胞壓力監(jiān)測(cè)法的缺乏,所得細(xì)胞還不
傳代時(shí)間-人源細(xì)胞和昆蟲(chóng)細(xì)胞該怎么安排?2017/08/03
細(xì)胞密度●人源細(xì)胞:貼壁培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)即應(yīng)進(jìn)行傳代。正常細(xì)胞達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)會(huì)停止生長(zhǎng)(接觸抑制),重新接種后需要較長(zhǎng)時(shí)間才能恢復(fù)。轉(zhuǎn)化細(xì)胞即使達(dá)到匯合狀態(tài)也能繼續(xù)增殖,但是在經(jīng)過(guò)大約兩個(gè)倍增時(shí)間后通常會(huì)變質(zhì)。類(lèi)似地,懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、未達(dá)到會(huì)和狀態(tài)時(shí)也應(yīng)進(jìn)行傳代。達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí),懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)聚集成團(tuán)塊,轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶時(shí)培養(yǎng)基會(huì)變得渾濁。●昆蟲(chóng)細(xì)胞:昆蟲(chóng)細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)應(yīng)進(jìn)行傳代。牢固貼壁的昆蟲(chóng)細(xì)胞達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)也可傳代,雖然此時(shí)細(xì)胞更容易
人源細(xì)胞培養(yǎng)常用試劑2017/07/27
人源細(xì)胞培養(yǎng)常用試劑一、PBS磷酸緩沖鹽溶液(一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用)PBS1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,*(Na2HPO4):1.42g,加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,zui后定容到1L高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。(一般情況下,現(xiàn)配現(xiàn)用,易變質(zhì)暴露在空氣中)二、細(xì)胞消化液0.25%*-0.02%EDTA的配制配方:100mlPBS,0.25g*步驟:1、先配100mlPBS2、稱*0.25g3、加入PBS
兔食管上皮干細(xì)胞培養(yǎng)步驟2017/07/25
干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)材料:1.大兔的正常食管組織2.6孔培養(yǎng)板:用多聚賴氨酸4℃包被過(guò)夜3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L*、200mg/L*和200000U/L*,pH7.44.*、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,*實(shí)驗(yàn)方法:1.處死大兔,取正常食管組織放入含雙抗的PBS(pH=7.2)中反復(fù)清洗3次,以洗去組織表面的血絲及粘液;2.小心的用眼科剪鑷將食管黏膜與黏膜下組織分離;3.分離出的粘膜組織用含雙抗的PBS(pH=7.2)反復(fù)沖洗若干次;4.將清洗后食管黏膜*成1mm3左右大
人源細(xì)胞的純化的兩種方法2017/07/20
人源細(xì)胞的純化一般分為兩種,即自然純化很人工純化.常用的純化方法有,酶消化法,細(xì)胞因子依賴純化法,機(jī)械刮除法,反復(fù)貼壁法,電烙篩選法.體外培養(yǎng)的細(xì)胞源于人或動(dòng)物或胚胎組織,體內(nèi)的細(xì)胞都是混雜生長(zhǎng),每一種組織都有血管和間葉組織,因此,來(lái)源于上述組織的培養(yǎng)材料的原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞絕大多數(shù)都呈混合生長(zhǎng),既有上皮樣細(xì)胞又有纖維樣細(xì)胞,纖維樣細(xì)胞又包括成纖維細(xì)胞、肌細(xì)胞、骨細(xì)胞、滑膜細(xì)胞等,混雜的細(xì)胞會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,而利用體外培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究時(shí),為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性、一致性、穩(wěn)定性、和可重復(fù)性
脂肪干細(xì)胞對(duì)人的作用2017/07/18
目前對(duì)于干細(xì)胞輔助脂肪移植技術(shù)的相關(guān)報(bào)道很多,日本的Yoshimura等人把從脂肪抽吸物中提取出的富含脂肪來(lái)源干細(xì)胞的基質(zhì)血管成分,添加入等待移植的顆粒脂肪組織中,提高了移植脂肪中的脂肪來(lái)源干細(xì)胞的含量,使脂肪移植更好的實(shí)現(xiàn)了穩(wěn)定的治療后效果?;加忻娌恐镜牟∪嗽诮邮芡昙?xì)胞輔助脂肪移植后,面部填充*,恢復(fù)情況良好,脂肪保留率高。脂肪來(lái)源干細(xì)胞輔助顆粒脂肪進(jìn)行移植,能提高移植脂肪的成活率,獲得穩(wěn)定的治療后效果,這項(xiàng)手術(shù)操作被稱為細(xì)胞輔助脂肪移植技術(shù),在國(guó)內(nèi)外已經(jīng)有報(bào)道和使用。同時(shí),大量實(shí)驗(yàn)表明,將
干細(xì)胞探索抗衰老機(jī)制2017/07/11
隨著衰老過(guò)程神經(jīng)元等體干細(xì)胞會(huì)失去對(duì)正常蛋白的維持能力。與之相比,多能干細(xì)胞不會(huì)衰老,并依靠某些機(jī)制維持蛋白組的完整性。來(lái)自德國(guó)科隆大學(xué)的研究人員在一項(xiàng)新研究中確定了多能干細(xì)胞用以維持蛋白質(zhì)質(zhì)量的機(jī)制。隨后他們?cè)谀J絼?dòng)物的成體組織中模擬了這些機(jī)制,發(fā)現(xiàn)能夠延長(zhǎng)壽命,推遲衰老相關(guān)疾病的發(fā)生。有機(jī)生命的存活與維持細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)質(zhì)量的能力有很大關(guān)系。一類(lèi)叫做分子伴侶的蛋白能夠促進(jìn)蛋白質(zhì)折疊,對(duì)于調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)質(zhì)量有非常重要的作用。這種能力會(huì)隨著衰老過(guò)程而下降,導(dǎo)致?lián)p傷蛋白和錯(cuò)誤折疊蛋白的積累,誘發(fā)細(xì)胞
如何選擇細(xì)胞培養(yǎng)板?2017/07/06
ATCC細(xì)胞培養(yǎng)板的規(guī)??纱罂尚?,你既可以使用生物反應(yīng)器,也可以使用培養(yǎng)瓶或多孔板。如今,利用多孔板的細(xì)胞培養(yǎng)模式正倍受青睞,因?yàn)檫@有助于研究多個(gè)動(dòng)態(tài)變量,減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間,并節(jié)約昂貴的試劑。除了標(biāo)準(zhǔn)的高通量微孔板,還有一些特殊的微孔板被開(kāi)發(fā)出來(lái),助力3D和器官型細(xì)胞培養(yǎng)。市場(chǎng)上的細(xì)胞培養(yǎng)板可不少,如何選擇合適的呢?在這篇文章中,BrandTechScientific的產(chǎn)品專家介紹了細(xì)胞培養(yǎng)中塑料制品的選購(gòu)要點(diǎn)。在他們看來(lái),我們需要重點(diǎn)考慮孔的數(shù)量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。1.孔的數(shù)量大多
人源細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可能出現(xiàn)的問(wèn)題及解決方式2017/07/04
在人源細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題,客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō),針對(duì)細(xì)胞不貼壁、生長(zhǎng)緩慢、生長(zhǎng)不好,甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因:●*消化過(guò)度●支原體污染●培養(yǎng)基pH值過(guò)堿(NaHCO3分解)●細(xì)胞老化●接種細(xì)胞起始濃度太低或太高解決方法:●縮短*消化時(shí)間或降低*濃度●分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物?!袷褂脽o(wú)菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無(wú)菌CO2●啟用新的保種細(xì)胞二、懸浮細(xì)胞成簇可能原因:●培
單個(gè)細(xì)胞的生長(zhǎng)過(guò)程2017/06/29
單個(gè)ATCC細(xì)胞的生長(zhǎng)過(guò)程即為細(xì)胞周期,所謂細(xì)胞周期是為研究細(xì)胞的生長(zhǎng)行為而提出的。在動(dòng)物體內(nèi)或體外培養(yǎng)中,細(xì)胞處于生長(zhǎng)或靜止?fàn)顟B(tài)。細(xì)胞生長(zhǎng)包括DNA合成及細(xì)胞分裂兩個(gè)關(guān)鍵過(guò)程。細(xì)胞周期即一個(gè)母細(xì)胞分裂結(jié)束后形成的細(xì)胞至其下一次再分裂結(jié)束形成兩個(gè)子細(xì)胞的這段時(shí)期,可分為間期和M期(分裂期)兩個(gè)階段。細(xì)胞群中多數(shù)細(xì)胞處于間期,少數(shù)細(xì)胞處于M期。一般間期的時(shí)間較長(zhǎng),而M期的時(shí)間較短。在間期,細(xì)胞完成生長(zhǎng)過(guò)程,主要為DNA的合成,即遺傳物質(zhì)DNA的復(fù)制。在M期,細(xì)胞所完成的主要是分裂,即遺傳物質(zhì)的分配
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