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摘要微小核糖核酸(miRNAs)在腫瘤發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后評(píng)估過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)控作用,是臨床腫瘤液體活檢極具應(yīng)用潛力的生物標(biāo)志物。

  【儀表網(wǎng) 研發(fā)快訊】 微小核糖核酸(miRNAs)在腫瘤發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后評(píng)估過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵調(diào)控作用,是臨床腫瘤液體活檢極具應(yīng)用潛力的生物標(biāo)志物。當(dāng)前主流檢測(cè)技術(shù)包括Northern印跡雜交、RT?PCR及微陣列芯片等,普遍存在操作繁瑣、檢測(cè)成本高、易產(chǎn)生放射性污染等問(wèn)題,極大限制了進(jìn)一步的推廣應(yīng)用,因此開(kāi)發(fā)高效、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)的miRNA檢測(cè)新方法具有重要臨床價(jià)值。
 
  針對(duì)上述技術(shù)瓶頸,我校光電與信息工程學(xué)院林多教授團(tuán)隊(duì)將具備超高靈敏分子檢測(cè)優(yōu)勢(shì)的表面增強(qiáng)拉曼光譜(SERS)技術(shù)與具備精準(zhǔn)核酸序列識(shí)別特性的CRISPR基因識(shí)別技術(shù)相結(jié)合,構(gòu)建了新型光激活CRISPR?SERS雙模式生物傳感體系。該體系可實(shí)現(xiàn)對(duì)鼻咽癌相關(guān)三種關(guān)鍵miRNA(miR?342?5p、miR?450b?5p、miR?451a)的特異性識(shí)別與SERS、熒光雙模式協(xié)同定量檢測(cè),對(duì)應(yīng)檢出限分別低至10.6 pM、11.0 pM、10.4 pM,展現(xiàn)出優(yōu)異的檢測(cè)靈敏度與定量性能。針對(duì)傳統(tǒng)CRISPR檢測(cè)體系易發(fā)生靶標(biāo)預(yù)反應(yīng)、引發(fā)非特異性反式切割、背景干擾嚴(yán)重、檢測(cè)準(zhǔn)確度受限等關(guān)鍵問(wèn)題,團(tuán)隊(duì)通過(guò)對(duì)crRNA進(jìn)行光敏功能基團(tuán)修飾,精準(zhǔn)調(diào)控CRISPR體系的激活條件,使其僅在特定波長(zhǎng)光照激發(fā)下啟動(dòng)識(shí)別與切割功能,成功構(gòu)建光激活智能CRISPR識(shí)別系統(tǒng)。該策略有效規(guī)避了體系本底干擾,顯著提升了檢測(cè)體系的特異性、可靠性與精準(zhǔn)度。研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步將所構(gòu)建的CRISPR?SERS雙模式生物傳感器應(yīng)用于臨床鼻咽癌患者血液樣本檢測(cè),可穩(wěn)定實(shí)現(xiàn)臨床樣本中目標(biāo)miRNA的精準(zhǔn)定量,且能夠有效區(qū)分腫瘤患者與健康人群樣本,為腫瘤無(wú)創(chuàng)液體活檢提供了光學(xué)檢測(cè)新策略。
 
  相關(guān)研究成果以“A photoactivated CRISPR-Cas12a-based biosensor for dual-mode detection of nasopharyngeal carcinoma-associated microRNAs”為題發(fā)表于國(guó)際權(quán)威期刊《Chemical Engineering Journal》(IF=12.5,中科院一區(qū)TOP期刊)。福建師范大學(xué)為論文第一單位,博士研究生王勇為第一作者,林多教授與福建省腫瘤醫(yī)院邱素芳主任為共同通訊作者。該研究工作得到國(guó)家自然科學(xué)基金、福建省杰出青年科學(xué)基金等項(xiàng)目的支持。
 

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